细胞嵌入皿

如何选择嵌入皿小室产品的孔径？

首先需要明确您所进行的应用是否需要细胞穿过小室膜上的孔。一般来说，共培养实验、Caco-2 Transport实验及构建细胞极化模型等不需要细胞穿膜，大多选择0.4μm等小孔径的产品。而在细胞迁移实验及侵袭实验中，细胞则需要穿过上室的膜、到达膜的背侧（少数情况下会落至下室中，如悬浮细胞的迁移/侵袭实验），因此需要选择较大孔径，（如肿瘤细胞的迁移、侵袭实验常选择8μm孔径的产品）。

如何挑选小室膜的材质？

洁特小室有聚碳酸酯（Polycarbonate, PC），聚酯（Polyesteror PolyethyleneTerephthalate，PET）两种膜材质。

PC和PET膜材质应用都很广泛，二者的主要区别在光透性方面，即PC膜半透明，不太方便在培养的过程中观察上室细胞的形态；PET膜透明，方便在相差显微镜下观察细胞的状态。

小室的膜材质与细胞培养皿/瓶不同，细胞贴壁情况会有什么差异吗？

未包被的小室膜材质（PC或PET）虽与普通塑料细胞培养皿/瓶的材质（Polystyrene, PS）不同，但膜的两侧均经过组织培养表面处理（TissueCulture Treated, TC Treated），与一般做细胞培养的PS耗材的表面处理相同。因此，在正常情况下，细胞在小室内的贴壁情况应与培养皿/瓶中类似。在普通培养时需包被基质蛋白等辅助贴壁的细胞，在小室上仍然需要包被。包被方法类似普通培养表面，可通过小室膜表面积换算所需包被液的量

小室产品可否灭菌后重复使用？

小室产品为一次性使用的耗材，不可重复使用。小室的孔板和膜的材质均无法承受高压蒸汽灭菌，且无法确认重复使用的小室是否被彻底清洁，因此无法保障重复使用的实验效果。

嵌入皿小室是否需要匹配特殊的接收板/下室产品?

与相应规格的普通细胞培养多孔板（如TCP010006、TCP010012、TCP010024等）适配。

在接种细胞前，是否需要进行“水化”？

大多数应用并不需要额外进行“水化”操作，该操作主要用于Matrigel预包被的侵袭小室，在使用前需平衡至室温，并加入预温至37摄氏度的无血清培养基，于培养箱中水化两小时。

少数情况下，提前在上下室加入培养基，并在培养箱中预孵育大于1小时可帮助细胞贴壁，但大多数细胞可以直接接种。

接种细胞的加液顺序如何？

一般先将预热的培养基加入多孔板的孔中（下室），再轻轻将小室放入孔中。在放入时，建议将小室稍稍倾斜，一侧先接触液面，以免垂直放入在小室下生成气泡。之后便可将混合均匀的细胞悬液加入小室内部。

小室膜上既然有许多小孔，在包被基质蛋白或一些单独加液在上室的情况下，液体是否会很快漏至下室？

一般不会。小室的膜上的小孔孔径有限，在表面张力的作用下，加入上室的包被液并不会很快漏下，如果短时间内发现有液体大量滴下，需检查小室的膜是否有裂痕或不完整的情况。

共培养实验中，上下室接种细胞的位置一般如何安排？

由于小室膜上小孔的存在，上下室的培养基可以交流互通，接种在上下室的细胞是相互影响的。接种细胞的位置安排需考虑收集细胞、进行下游检测的方便程度，同时也需要考虑到上下室培养面积的差异（上室的有效生长面积比下室小，相应地，接种的细胞量恐怕有差异），您可参考相关文献或进行预实验来最终决定实验安排。

小室内接种的细胞可否消化收集？

可以的。您可采用在普通培养器皿中消化相应细胞的试剂（如胰酶等），在上下室均加入推荐体积的消化液。

对小室内接种的细胞进行药物处理时，药物是仅需加入上室吗？

由于小室膜上小孔的存在，我们建议您在上下室内均加入含有同样浓度药物的培养基，以确保您的药物处理浓度。

我们的耗材都是无DNA酶，无RNA酶并且无热原吗？
 
通常我们的产品都是无DNA酶，无RNA酶且无热原的，但其他品类有个别产品可能不包含这些检测项目，还请参考相应产品的质检文件（COA）。

洁特有DEPC处理的耗材吗？
 
DEPC处理是为了让耗材不携带核酸酶，而洁特的耗材都是无DNA酶，无RNA酶的。这是基于我们从原料开始控制生产流程的结果。最终产品我们对核酸酶进行质量检测，而不会额外加入DEPC处理步骤。其产品应用与DEPC处理过的耗材是一致的，洁特产品可以代替DEPC处理耗材使用于分子生物学实验中。

如何恰当储存洁特耗材产品？
 
除非有特别要求，一般洁特耗材产品应存放于干燥的室温环境，注意避开紫外，臭氧，废气，烟雾等极端条件。部分有特殊存储要求的产品会在外箱标签标示，敬请留意。

如果您购买的是特定的培养容器，建议查看产品说明书获取准确的生长面积和推荐的培养基添加量。同时，不同细胞类型对培养基的需求和接种密度也有所不同，培养时所需的培养基成分、接种量和培养条件都可能存在差异，还需要根据细胞的具体种类进行调整。

TC-treated 就是组织培养（Tissue Cultured）处理表面的意思，洁特通过电晕放电或气体等离子的手段提升聚苯乙烯（PS）表面的亲水性，改善细胞贴壁所需蛋白的粘附情况从而帮助细胞贴壁。

悬浮细胞没有细胞贴壁的需求，一般使用未处理表面培养耗材即可。TC处理表面也可培养悬浮细胞，但根据细胞的状态和种类，可能会有一些细胞出现贴壁的现象

您可以选择未处理表面的培养器皿自行包被细胞外基质。当然这种情况下TC处理表面的器皿也是可以使用的。